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        江蘇鹽城濱??颠_醫院PCR實驗室

        更新時間:2020-11-25

        項目地點:江蘇


        臨床基因擴增實驗又稱PCR實驗室, 是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、冠狀病毒等感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內所含的基因進行檢測,可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒,(測出一些病毒含量不高的感染者體內是否含有特定的病毒。)并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優點,具有檢測結果可靠性、準確性和安全性和權威性。


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         設計圖紙


        一般的PCR實驗室實驗區包括:試劑準備區、標本制備區、擴增區、產物分析區。各區配套緩沖間及公共走廊。根據使用儀器的功能,實驗區可適當合并,例如使用實時熒光PCR儀的,擴增區、擴增產物分析區可合并?!缎滦凸跔畈《痉窝讓嶒炇覚z測技術指南(第四版)》指出,新冠病毒核酸檢測方法主要是實時熒光RT-PCR方法,所以用于新冠病毒檢測的PCR實驗室可以設置為“四區”或者“三區”。各區應設置機械通風系統,并設置緩沖間。各實驗區與緩沖間應有一定的壓差,保證合理的空氣流向,防止交叉污染。


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        三區平面圖


        本項目建筑面積較小,故采用三區設計,合并擴增區和產物分析區。


        PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,宜采用全送全排的氣流組織形式。


        氣流組織技術說明:

        1.PCR實驗室暖通設計為全新風全排系統同時也是為了保證PCR實驗室壓差要求,初中效衛生型新風機組給各區送新風,排風機組分別進行各區的排風,排風后再經過***過濾和組合式外排廢氣處理裝置處理達標后高空排放到大氣中,為了避免交叉污染,沒有回風,嚴格控制送排風口風量大小保證各實驗區的壓力要求。


        2.各區送排風機聯動啟停,先啟動排風機后啟動送風機,停機先停送風機后停排風機,這樣可以完全阻斷實驗室的污染泄露。


        3.各實驗區域之間具備單向的氣流組織形式,形成單向流程的保護屏障,實驗室換氣次數宜少于每小時10次。


        4.實驗室氣流組織采用頂送底排,初中效送風,***底排風。


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        試劑準備區,該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。因此,該區并不產生污染源,但須確保試劑免受外界污染,如該實驗區按《標準》要求相對緩沖間設置為負壓,則緩沖間相對走廊需設置為正壓。其實,這個區域比較靈活,實驗區相對緩沖也可以設置為常壓或正壓,但緩沖間相對走廊需設置為正壓!


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        試劑準備區


        標本制備區,該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。此區取樣時病毒還未滅活,且在取樣操作時,容易造成氣溶膠擴散。為保護人員安全,必須在生物安全柜內操作,防止標本氣溶膠的擴散。此后,標本經過滅活處理,使病毒蛋白不再有生理活性,失去感染、致病和繁殖能力,使操作人員在對樣本進行檢測時相對安全,但是病毒蛋白的基因序列并沒有受到影響。因此,該區為主要污染區域,必須在生物安全柜內操作!要求實驗區相對緩沖間設置為負壓,緩沖間相對走廊需設置為負壓。


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        標本制備區


        在擴增區和產物分析區,兩區域主要分別進行的操作為DNA或cDNA擴增和擴增片段的測定。操作過程中,要防止含病毒核酸的氣溶膠通過開門卷吸等途徑,擴散出去對試劑與標本造成污染,造成“假陽性”現象。所以核酸擴增室及產物分析區相對緩沖間應呈相對負壓狀態,緩沖間相對走廊亦需設置為負壓。


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        走廊


        為降低PCR實驗室對實驗室外部環境和人員帶來的風險,內走廊相對實驗室外可以保持常壓或正壓,各區壓差可設置為5~10Pa。


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        走廊(壓差表)


        注意事項:

        1.PCR實驗室每個區應設置壓差表監控實驗室壓差實時情況。


        2.為避免交叉污染,進入各個工作區域壓差必須嚴格遵循單一方向流動,即只能從試劑準備區→標本制備區→擴增區→產物分析區流動。


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